Proteus (bakteerit)

Proteus
Elektronimikroskoopilla kuva Proteus penneri , bar vastaa 200 nm.
Järjestelmää
Verkkotunnus : Bakteerit (bakteerit) Osasto : Proteobakteerit Luokka : Gammaproteobakteerit Tilaa : Enterobakteerit (Enterobacterales) Perhe : Morganellaceae Tyylilaji : Proteus
Tieteellinen nimi
Proteus
Hauser 1885 emend. Hyun et ai. 2016

Proteus on suvun ja bakteerien ja se on nimetty kreikkalaisen jumalan meren, Proteus , joka on tunnettu siitä, Homeroksen Odysseia olevan erittäin vaihteleva ulkopuolella. Tämä koskee myös bakteerit: pituus ja toiminta solujen ja Proteus - laji on muuttuja; voidaan muodostaa niin sanottuja "parvisoluja", jotka aiheuttavat "parvi-ilmiön".

Proteus- suvun bakteerit ovat yleisiä eri elinympäristöissä , kuten maaperässä ja vedessä . He pystyvät hyödyntämään kuollutta biomassaa ja laskemaan siten saprobionteihin . Heillä on käytössään lukuisia entsyymejä , esimerkiksi ureaasi . Ne ovat myös läsnä suolistossa sekä eläinten ja ihmisten, sekä ulostetta . Joillakin Proteus- suvun edustajilla voi olla myös patogeeninen vaikutus, niiden katsotaan olevan fakultatiivisia patogeenisiä . Ne voivat esimerkiksi aiheuttaa virtsateiden infektioita .

Proteus- infektio on erotettava Proteus-oireyhtymästä , joka on hyvin harvinainen vakava synnynnäinen kasvuhäiriö, jolla on vain yhteinen nimi bakteerien kanssa.

ominaisuudet

Ulkomuoto

Proteus mirabilis suurella mikroskooppisella suurennuksella, vasemmalle Giemsa-värjäyksen jälkeen , heti Gram-värjäyksen jälkeen

Solut edustajien suvun Proteus ovat sauvan muotoisia , joiden halkaisija on 0,4-0,8 um ja hyvin vaihteleva pituus. Ne on merkitty flagellilla ( peritrich ), joka on jaettu tasaisesti kehon pinnalle ja on siten aktiivisesti liikkuva ( liikkuva ). Gram-testi on negatiivinen, niin Proteus kuuluu ryhmään, gram-negatiivisia bakteereita vastaan.

Parvi-ilmiö

Proteus , parveen veriagarilla . Rivitalot ovat selvästi tunnistettavissa

Proteus osoittaa selkeän parveilevan käyttäytymisen, joka voidaan selittää solujen dimorfismilla ("kahdella muodolla"). Nestemäisissä ravinneväliaineissa solut ovat lyhyiden sauvojen muodossa, joiden pituus on 1-2 um, jotka voivat liikkua peritricalipunsa läpi (flagella jakautuu tasaisesti solun pinnalle). Niitä kutsutaan "uimisiksi soluiksi". Tästä muodostuu pitkiä (20–80 µm), erityisen tiheästi merkittyjä soluja ("parvesoluja") kiinteälle ravintoalustalle, joka voi liikkua ravinneväliaineen pinnalla synereesin muodostamassa hyvin ohuessa nestekerroksessa ("parvi " "). Tämän seurauksena alun perin kapeampi siirtomaa leviää nopeasti ravintoalustan pinnalle. Parvi ja paikallinen lisääntyminen vuorottelevat lyhyemmän morfotyypin (konsolidoitumisen) kanssa. Tämän seurauksena pinta on suuren rivitalon peittämä.

Vaihekontrastimikroskoopilla kuvia on Proteus mirabilis kulttuuriin. Vasemmalla ensimmäisen aktiivisen parveiluvaiheen alku, oikealla, kun konsolidointi alkaa 1,5 tuntia myöhemmin. Mittakaava 10 µm.

Uintasolujen kehittyminen parvesoluiksi tapahtuu, kun lipun pyöriminen estetään kosketuksesta pinnan kanssa. Flagellaa vastaan ​​suunnattujen vasta-aineiden lisääminen johtaa myös tähän tulokseen. Tässä antigeeni-vasta-ainereaktiossa flagellaa kutsutaan H- antigeeneiksi (katso osio Kemotaksonomia ). Lipopolysakkaridit , että ulompi kalvo solut ovat myös tärkeitä parvi ilmiö. Lipopolysakkaridien polysakkaridiosa , joka tunnetaan nimellä O6-antigeeni, on edellytys parvesolujen muodostumiselle. Mutantit ja Proteus mirabilis , jotka tuottavat lipopolysakkaridi, joka koostuu vain lipidi A ja ydinalue ilman O-spesifinen polysakkaridi, eivät pysty parvi. Replikaatio DNA tapahtuu ilman muodostuu uusia soluseinien ja septumien solujen, joka johtaa hyvin pitkiin polyploideja soluja. Tarkka molekyylitausta on edelleen epäselvä, mutta todennäköisesti mukana ovat niin kutsutut SulA- proteiinit , jotka tunnetaan Escherichia colista .

Parvisolut muunnetaan takaisin uintisoluiksi, kun paikallinen solutiheys on pieni. Tehdä tämän, solut on kyettävä mittaamaan populaation tiheyden kautta kemialliseen viestintään ; tätä kutsutaan quorum sensing . Signaalimolekyyleinä käytettyjen autoinduktoreiden etsiminen ei ole vielä kesken. Autoinduktori-1: tä (AI-12) ei tuoteta soluissa, eikä autoinduktori-2: lla (AI-2) ole merkitystä parven ilmiössä. Sitä vastoin oleiinihappo , glutamiini ja putressiini on tunnistettu signaalimolekyyleiksi ilman, että vaikutusmekanismia ymmärretään täysin. Flagellan rotaation estämisen lisäksi parvisolujen muodostuminen aloitetaan solunulkoisen putressiinin kertymällä ja O-antigeenien vuorovaikutuksella pinnan kanssa. Keskeinen tapahtuma parvisolujen muodostumisprosessissa on transkription säätelygeenin FlhD2C2 uudelleen säätely, joka aktivoi lippulaarisen regulonin ja muita geenejä.

Kasvu ja aineenvaihdunta

Proteus- suvun edustajat ovat fakultatiivisesti anaerobisia , so. H. ne voivat kasvaa hapen kanssa tai ilman . Katalaasi testi on positiivinen Heille oksidaasi testi negatiivinen. Lisäksi niiden aineiden vaihtoa ja energia on että niiden ominaisuudet ovat kuten chemoorganotrophic ja heterotrofisia , he käyttävät orgaanisia yhdisteitä energialähteenä ja myös rakentaa solujen oman aineita. He elävät saprofyyttisesti ja hyödyntävät kuollutta biomassaa .

Proteus- suvun bakteerit ovat mesofiilisiä , so. H. He suosivat keskilämpötiloja, bakteerikasvu tapahtuu lämpötilavälillä 10–37 ° C, optimaalisesti noin 30 ° C. Mitä tulee pH-arvoon , ne on merkittävä , koska neutrofiilisiä , ne kasvavat pH-arvo on 5-9, optimaalisesti pH-arvossa 7 ja 8. Ne sietää massaosuus on 0-10% ja natriumkloridia ( Ravinnealustassa optimaalinen 1-2% NaCl.

He käyttävät erilaisia hiilihydraatteja hiili- ja energialähteinä , esim. B. glukoosi , maltoosi ja sakkaroosi , usein muodostuvat haposta ja kaasusta, samalla kun ne suorittavat fermentaatioita hapettomissa olosuhteissa (ilman happea) , esimerkiksi sekahappokäymisiä . He eivät voi käyttää disakkaridi laktoosia (maitosokeria), koska ne puuttuu entsyymi β-galaktosidaasi . Ne myös vähentävät nitraatti ja nitriitti .

Proteus on myös tunnettu siitä, että kyky hydrolyysiin ja gelatiini (liivate-nesteyttäminen), rikkivetyä muodostumista rikkiä sisältävien aminohappojen ja Proteus voi nykyisten entsyymi ureaasi urean sisään ammoniakin ja hiilidioksidin sarake, joka johtaa korottamista pH-arvo väliaineessa. Useimmat suvun jäsenet ovat lipaasi , että lipidit on maissiöljy jakaa hydrolyysi. Lisätietoja löytyy osasta Todisteet .

Proteus- suku on hyvin samanlainen kuin Providencia- ja Morganella-sukut , ne ovat kuuluneet Morganellaceae- perheeseen vuodesta 2016 lähtien . Kaikki kolme sukua entsyymin tuottamiseksi fenyylialaniinin deaminaasi , mutta ei arginiinidihydrolaasille (ADH), ei voi aineenvaihdunta malonihappo ja eivät muodosta happoa aikana dulsitoli , D - sorbitoli ja L - arabinoosi aineenvaihduntaa. Toisin kuin nämä kaksi sukua, Proteuksen edustajat voivat tuottaa rikkivetyä ja lipaaseja, hydrolysoida gelatiinia , mutta ne eivät tuota mannoosia .

Kemotaksonomia

Kaavamainen kuvaus enterobakteerista ja antigeenirakenteiden lyhenteet : K ( kapseli ), O (somaattinen), F ( fimbriae ), H (flagella)

Bakteerisolun komponentit toimivat antigeeneinä : Niin kutsutut somaattiset O-antigeenit esiintyvät kerran ja sitten flagellan aiheuttamat H-antigeenit. Somaattiset O-antigeenit perustuvat solujen ulkokalvossa oleviin lipopolysakkarideihin.

Antigeenien nimitys ja solujen määritys on kuvattu Kauffmann-White-kaaviossa, jota käytetään salmonellalla . Serotyyppien erilaistamista ei käytetä rutiinidiagnostiikassa. O- ja H-antigeenit ovat mukana parven ilmiössä.

Rasvahapot kalvolipideissä

Palmitiinihappo

cis- palmitolihappo

cis- rokotehappo

Proteus - lajit ovat niiden membraanilipidien vastaan. a. seuraavat Rasvahappoketjuista: 28-30% palmitiinihappoa (tyydyttynyt rasvahappo kanssa lyhenne C _{16: 0} ), 15-36% seoksen cis - palmitoleiinihapon (kertatyydyttymätön omega-n-rasvahappo - in tässä tapaus omega-7-rasvahappo - lyhenteellä C _{16: 1 (ω - 7) c} ) ja / tai isomeerinen omega-6-rasvahappo lyhenteellä C _{16: 1 (ω - 6) c} ( systemaattinen nimi : (10) Z ) -heksadek-10-eeenihappo) sekä 16 - 19% cis - rokotehapon seosta (kertatyydyttymätön omega-7-rasvahappo lyhenteellä C _{18: 1 (ω - 7)} , jota ei voida erottaa käyttäen käytetyn analyyttisen menetelmän _c ) ja / tai isomeeriset omega-6-rasvahapon kanssa lyhenne C _{18: 1 (ω - 6) c} (systemaattinen nimi: (12 Z ) -octadec-12-eenihappo). Tärkeimmät esiintyvät ubikinonit ovat Q-8 ja Q-10.

genetiikka

Genomi useita Proteus lajeja on sekvensoitu, mukaan lukien yksitoista kannat ja Proteus mirabilis ja kolmen kannan Proteus vulgaris . Genomiin Proteus mirabilis HI4320 kanta on kooltaan 4,06 miljoonan emäksen paria (MBP), joka on suurin piirtein verrattavissa genomin koko on Escherichia coli . On 3562 proteiineja selityksin varustettua . Sekvensoitu plasmidi on 0,04 miljoonan emäksen paria kooltaan ja sisältää 48 geenit . Sekvensoinnin tulokset osoittavat , että bakteerien DNA : ssa GC-pitoisuus ( nukleoemästen guaniinin ja sytosiinin osuus ) on 38,9%.

Patogeenisuus

Joillakin Proteus- suvun edustajilla voi olla patogeeninen vaikutus heikentyneen terveyden omaaviin ihmisiin, joten he ovat fakultatiivisia patogeenisiä (opportunistisia) taudinaiheuttajia . Niitä esiintyy usein paksusuolessa , jopa terveillä ihmisillä , eivätkä ne välttämättä aiheuta sairauksia. Vastaavasti immuunipuutteiset ihmiset voivat kärsiä seuraavista näiden bakteerien aiheuttamista oireista: virtsatieinfektio , haavainfektio ja sepsis . Lajit Proteus mirabilis ja Proteus vulgaris eristetään useimmiten. Virtsatieinfektioiden uskotaan, että esiintyminen bakteeriureaasissa virulenssitekijänä toimii ja lisäämällä bakteerikasvun pH: ta on mahdollista. Se voi myös edistää munuaiskivien muodostumista .

Proteus hauseri , P. mirabilis , P. penneri ja P. vulgaris  luokitellaan riskiryhmään 2 biologisten aineiden asetuksella yhdessä TRBA: n ( tekniset säännöt biologisille aineille) 466 kanssa. Muut Proteus- lajit kuuluvat riskiryhmään 1 (niitä pidetään ei-patogeenisinä) tai niitä ei ole vielä osoitettu.

todiste

Proteus vulgaris -laktoosinegatiiviset pesäkkeet MacConkey-agarilla

Bakteerien eristämiseksi näytteistä, esim. B. virtsaa käytetään yleensä selektiivisiä ravintoalustoja, jotka soveltuvat enterobakteerien edustajien eristämiseen ja erilaistamiseen , esimerkiksi eosiinimetyleenisininen agar (EMB agar), MacConkey agar tai VRB agar . Proteus- suvun bakteerit kasvavat tyypillisesti laktoosinegatiivisina ja mahdollisesti sakkaroosipositiivisina pesäkkeinä (jos ravintoalusta sisältää sakkaroosia, kuten EMB-agaria).

Biokemialliset todisteet

Biokemiallisia piirteitä, kuten läsnä olevia entsyymejä ja niistä johtuvia aineenvaihduntaominaisuuksia , voidaan käyttää värikkäinä sarjoina Proteus- lajien tunnistamiseksi tai erottamiseksi muilta Morganellaceae-edustajilta, erityisesti Providencia ja Morganella , koska niillä on samanlaiset metaboliset ominaisuudet. Kolmen sukun edustajien järjestelmällinen yleiskatsaus vuodelta 2000 on seuraavan taulukon tulosten perusta.

Huomautukset:

1. + tarkoittaa positiivista, - negatiivista tulosta; jos se on suluissa, pätee, että useimmat suvun edustajat (> 75%), mutta eivät kaikki, osoittavat tämän tuloksen; indikaatio d (eri) tarkoittaa "muuttujaa", d. toisin sanoen on olemassa kantoja, jotka voivat tuottaa positiivisen tuloksen, sekä kantoja, jotka eivät tuota; tai positiivinen reaktio on liian heikko, jotta sitä ei voida nähdä selvästi.
2. Reaktiot, jotka soveltuvat erilaistamiseen, ainakin yhdessä muiden kanssa, ovat väriltään kontrastisia.
3. "Haponmuodostus ...": Nämä ovat reaktioita, joissa hiilihydraattien käyttöä tarkistetaan; luetellaan monosakkaridit , disakkaridit ja sokerialkoholit . Kun käytetään hiilihydraatteja, pH-indikaattoria käytetään tarkistamaan, muodostuuko happoja hajoamisen aikana.

Seuraavassa on saatu tuloksia joistakin yksittäisten Proteus- lajien biokemiallisista kokeista , jotka - ainakin yhdessä muiden kanssa - soveltuvat erilaistamiseen. Lajit, jotka on ensin kuvattu vuonna 2016 ja myöhemmin, on lajiteltu taulukon oikeaan osaan. Katso lisätietoja +, - jne. Yllä olevista kommenteista. Erittely n. tarkoittaa "ei tarkistettu".

Näitä tutkimuksia voidaan käyttää pienoiskoossa käytetyissä testijärjestelmissä (esim. API-20E-järjestelmä). Tulokset voidaan tarkastella DSMZ: n ( saksalainen kokoelma mikro-organismeja ja soluviljelmiä ) vapaasti käytettävissä olevassa tietokannassa BacDive , esimerkiksi Proteus vulgaris . Laitteiden suhteen automatisoidut järjestelmät (esim. Vitek-järjestelmä) perustuvat myös metabolisiin ominaisuuksiin.

Lisätodisteet

Tunnistaminen MALDI-TOF- menetelmällä yhdessä massaspektrometrian (MS) kanssa on yhä tärkeämpää , etenkin laboratorioissa, joissa näytteen läpäisykyky on suuri. Myös tässä ensimmäinen vaihe on yleensä eristää bakteerit testimateriaalista viljelemällä niitä ravintoalustoilla. Tunnistamista varten tarvitaan tietokantoja, jotka sisältävät rakenteiden bakteerispektrit tietyn tunnistemallin (engl. Pattern ) perusteella, tehtävä osoitetaan suvulle tai lajille. Biomarkkereita käytetään varten massaspektrit, jotta voidaan parantaa spesifisyys tunnistaminen, erityisesti lääketieteellisesti merkityksellinen bakteerit . Tiettyjen proteiinien sisällä bakteerisolut, erityisesti ribosomaalisen proteiinit, toimivat biomarkkereita , koska ne ovat runsaasti näytteessä läsnä käytetystä materiaalista ja on koodattu erittäin konservoitunut tavalla , jonka geenejä on bakteerikromosomiin .

Vuonna 2017 tunnistustuloksia verrattiin käyttämällä MALDI-TOF MS: ää käyttäen biomarkkereita ja tavanomaisia ​​biokemiallisia menetelmiä (Vitek 2). Kun kyseessä oli 222 gramnegatiivista bakteeria yhteensä 383 isolaatista, MALDI-TOF MS johti sukun oikeaan tunnistamiseen 97,6% ja lajin oikeaan tunnistamiseen 97,4%. Nämä arvot ovat parempia verrattuna tavanomaiseen tunnistamiseen, kun vastaavasti 95,7% ja 88,0%. 383 isolaatissa oli 14 Proteus- suvun edustajaa , jotka kaikki tunnistettiin oikein sukutasolla käyttäen MALDI-TOF MS: ää (100%). Niiden joukossa on seitsemän oikeaa P. mirabiliksen tunnistetta (100%) ja seitsemän oikeaa P. penneri / vulgaris -tunnistetta (100%). Perinteisillä menetelmillä tunnistamisen spesifisyys suvutasolla on myös 100%, mutta vain kuusi seitsemästä tapauksesta tunnistaa P. penneri / vulgarisin oikein . Nämä tulokset osoittavat myös, että laboratorioissa rutiininomaisesti käytetyt menettelyt eivät salli mitään eroa P. pennerin ja P. vulgariksen välillä .

Tutkimusajan minimoimiseksi edelleen on olemassa tapoja käyttää tutkimusmateriaalia suoraan tunnistamiseen MALDI-TOF MS: n avulla - ilman edeltävää viljelyä ja siten bakteerien eristämistä. Vuonna 2019 tehdyssä tutkimuksessa virtsanäytteitä, joiden tilavuus oli 30 ml ja jotka sisälsivät oletettavasti virtsatieinfektioiden patogeenejä , käytettiin suoraan MALDI-TOF-MS: ssä sentrifugoimalla ja pesuvaiheilla rikastamisen jälkeen . 1638 virtsanäytteestä 265 sisälsi pääasiassa yhden bakteerilajin, joista 184 oli gram-negatiivisia, joista 163 (88,6%) tunnistettiin oikein lajien tasolla. P. mirabilis sisältyi seitsemään rikastettuun isolaattiin ; lajien tasolla on kuusi oikeaa tunnistetta (85,7%), yhdessä tapauksessa vain suvun tasolla. Jos bakteerit eristettiin aiemmin viljelemällä, kaikki seitsemän isolaattia tunnistettiin oikein nimellä P. mirabilis . Virtsanäytteistä kertyneiden bakteerien suora tutkimus MALDI-TOF MS: n avulla kestää alle kaksi tuntia, jos bakteereita viljellään etukäteen, toimenpide kestää yhteensä 18-48 tuntia.

Systemaattisuus ja taksonomia

Ulkoinen järjestelmä

Jo 1960-luvulla, läheinen suhde suvuista Proteus , Providencia ja Morganella tiedossa näytettiin perusteella fenotyyppisten ominaisuuksien. Heidät lueteltiin Proteeae- heimossa . Enterobacterales-järjestyksen perustamisen jälkeen vuonna 2016 ne kuuluvat Morganellaceae-perheeseen muiden sukujen ohella. Enterobacterales kuuluvat luokkaan gammaproteobacteria , joka puolestaan kuuluu rasitusta ja proteobakteerien .

Sisäinen järjestelmä

Valomikroskooppi kuva Proteus mirabilis jälkeen gramvärjäyksellä

Tällä hetkellä (syyskuu 2020) tunnetaan yhdeksän nimettyä lajia ja joukko nimeämättömiä genotyyppejä . Proteus vulgaris on tyyppi laji suvun Proteus Hauser 1885 (hyväksytty luettelot 1980) emend. Hyun et ai. 2016. Lajit ovat (syyskuusta 2020):

• Proteus alimentorum Dai et ai. 2018
• Proteus cibarius Hyun et ai. 2016
• Proteus cibi Dai et ai. 2019
• Proteus columbae Dai et ai. 2018
• Proteus hauseri O'Hara et ai. 2000
• Proteus mirabilis Hauser 1885
• Proteus penneri Hickman et ai. 1983
• Proteus terrae Behrendt et ai. 2016
• Proteus vulgaris Hauser 1885 (hyväksytyt luettelot 1980) ilmestyy. Oikeudellinen komissio 1999.

Joitakin synonyymejä ja muutoksia

Aikaisemmin luetellut lajit Proteus myxofaciens eroavat geneettisesti melko paljon suvun muista lajeista, joten se erotettiin Cosenzaea myxofaciens -lajiksi omaan Cosenzaea-sukuunsa , joka kuuluu edelleen Morganellaceae-perheeseen.

Luokittelu sukujen Proteus , Providencia ja Morganella heimo Proteeae 1960 osoittaa ensimmäisen vaikeus määrittämällä tiettyjen eliösystematiikan sukuun varmuudella. Vastaavasti on olemassa lukuisia synonyymejä . Julkaisussa Morganella morganii ( Winslow et ai. 1919) Fulton 1943 ja Proteus morganii ( Winslow et ai. 1919) Yale 1939, Providencia rettgeri ( Hadley et ai. 1918) Brenner et ai. 1978 ja Proteus rettgeri ( Hadley ym. 1918) Rustigian ja Stuart 1943 sekä Providencia alcalifaciens ( de Salles Gomes 1944) Ewing 1962 ja Proteus inconstans ( Ornstein 1920) Shaw ja Clarke 1955 ovat molemmat homotyyppisiä synonyymejä , koska molemmilla lajeilla on saman tyyppinen tavaratila.

Yleisnimen "Proteus" ensimmäinen käyttö bakteriologisessa nimikkeistössä on peräisin vuonna 1885 Gustav Hauserilta , joka kuvasi kahta tyyppiä näitä organismeja, jotka hän eristää mätänneestä lihasta , Proteus mirabilis ja Proteus vulgaris . Joten tällä organismilla on pitkä historia mikrobiologiassa . Viime vuosikymmeninä taksoni Proteus , erityisesti Proteus vulgaris , on kokenut joitain muutoksia taksonomiassa . Vuonna 1982 Proteus vulgaris erotettiin kolmeen ryhmään (Englanti biogroups ) perusteella indolin valmistusta , käyttöä salisiinista ja eskuliinin pilkkominen . Ensimmäinen ryhmä (bioryhmä 1) käyttäytyy negatiivisesti kaikissa kolmessa reaktiossa ja erotettiin uudeksi lajiksi ( Proteus penneri ). Toinen ryhmä (bioryhmä 2) käyttäytyi positiivisesti kaikissa kolmessa reaktiossa ja pysyi nimellä Proteus vulgaris . Kolmas ryhmä (bioryhmä 3) on positiivinen indoli testi , mutta negatiivinen käyttöä salisiinista ja eskuliinin jakautuminen. Geneettiset tutkimukset vuonna 1995 DNA-hybridisaation avulla johtivat bioryhmän 3 jakamiseen neljään taksoniin ( genomilajit 3-6), joita alun perin ei kuvattu lajeiksi, ennen kuin ne oli paremmin karakterisoitu; yhtä heistä ( genomilaji 3) kuvattiin vuonna 2000 nimellä Proteus hauseri . Hyun et ai. julkaisi Proteus- suvun laajennetun kuvauksen (emendation) vuonna 2016, jossa oli ensimmäinen kuvaus P. cibariusista .

Tapahtuma

Katsaus ihmisen ruoansulatuskanavaan

Proteus- suvun bakteerit ovat levinneet saprofyytteinä erilaisissa elinympäristöissä , kuten maaperässä ja vesistöissä, jotka sisältävät orgaanista ainetta, kuten kuollutta biomassaa ja elävien olentojen eritteitä . Nämä bakteerit ovat myös läsnä on suolistossa sekä eläinten ja ihmisten sekä ulosteeseen .

Vuonna artikkeli julkaistiin vuonna tiedelehti Microbial Ecology vuonna 2016 , yli 150 tieteellistä artikkelia aiheesta ”merkitys ja toiminnot Proteus spp. Bakteerit luonnollisessa ympäristössä ”: Niitä esiintyy terveiden ihmisten koko ruoansulatuskanavassa . Brasilialaisessa tutkimuksessa, jossa oli yhtä monta naista ja miestä, bakteerit löydettiin maha-suolikanavan vastaavasta osasta seuraavasti: vatsa 8%, pohjukaissuoli (duodenum) 45%, jejunum (tyhjä suolisto) 45%, ileum (ileum) ) 20%, lisäys (umpisuolen alue) 12%, paksusuoli : nouseva paksusuoli 33%, poikittainen paksusuoli 37%, laskeva paksusuoli 25%, sigmoidinen paksusuoli 35% ja peräsuoli 30%. Korkeimmat pitoisuudet bakteerien, ilmaistuna pesäkettä muodostavaa yksikköä (CFU) millilitraa kohti, on todettu, että sykkyräsuolessa 10 ⁶ , eri alueilla paksusuolen 10 ⁵ kohteeseen 10 ⁷ ja peräsuolessa 10 ⁷ CFU per millilitra.

Proteus- suvun bakteereja esiintyy myös lukemattomien - sekä villien että kotieläinten - suolistossa, mukaan lukien gorillat , pesukarhu , rotat , lentävät ketut , linnut , käärmeet , alligaattorit , kilpikonnat , sammakkoeläimet , kalat , hyönteiset , " äyriäiset ", kuten simpukat ja katkaravut tai taskuravut ; Kotimaan koirat , kotikissojen , kesysian , kesyt hevoset , kotimainen aaseja , kotieläinten ja siipikarjan . Proteus- lajia ei ole määritelty kaikissa dokumentoiduissa löydöksissä ; jos näin on, tiedot annetaan P. mirabilisista , P. vulgaris -ryhmästä (mukaan lukien P. hauseri , joka myöhemmin erotettiin erillisenä lajina, ja genomilajista ) ja P. penneri . Proteus mirabilis eristettiin todennäköisemmin kotikoirista, kotieläimistä ja linnuista, kun taas Proteus vulgaris et ai. löydettiin kotisikoista ja kylmäverisistä eläimistä .

Lajeja kuvattiin ensimmäisen kerran vuonna 2016 ja myöhemmin eristettiin ruoka ( s alimentorum kohteesta sianlihaa ja hummeri , P. cibarius päässä Jeotgal , suolattu, fermentoitu lautasen tehty äyriäiset, joka on synonyymi jäsenille grampositiivisen suvun Jeotgalicoccus , P. columbae alkaen kyyhkynen lihaa ), P. terraeksi löydettiin maanäytteestä ( turve maaperä mistä nummi alueella ).

In lääketieteellisten näytteiden, kuten virtsa ja haavat on P. mirabilis osoitettu harvinainen, muut suvun jäsenistä, vaikka tarkkaa tyypin tunnistaminen tapahtui. Noin 80-90% Proteus spp. aiheuttamat infektiot johtuvat P. mirabilisista . Vertaileva tutkimus terveiden ihmisten ja ripulista kärsivien potilaiden ulostenäytteistä osoitti, että P. mirabilis voidaan eristää useammin sairaiden kuin terveiden ihmisten näytteistä. Yksi mahdollinen selitys tälle on, että ripuli johtuu muista taudinaiheuttajista, mutta se antaa P. mirabilisille mahdollisuuden lisääntyä opportunistisesti. Sitä vastoin P. vulgaris -bakteerin esiintyvyyden suhteen ei havaittu eroa kahdessa ihmisryhmässä.

merkitys

ekologia

Saprofyyteinä Proteus- suvun bakteerit osallistuvat orgaanisten yhdisteiden (kuolleen biomassan) hajoamiseen ympäristössä. Kun läsnä on eri entsyymien avulla ne voivat hajottaa ureaa (kautta ureaasi), hydrolysoivat proteiinit (kautta proteolyyttisiä entsyymejä ) ja oksidatiivisen deaminaatio ja aminohappoja . Ne toimivat purkajat on typpikierto ja muuntaa typpeä sisältävät orgaaniset yhdisteet (proteiineja, aminohappoja, ureaa) epäorgaanisiin aineisiin ja amino typen ne sisältävät osaksi ammonium- ioneja, jolloin näitä tuotteita voidaan jälleen käyttää ravinteita mukaan kasveja .

Vuonna rhizosphere , niillä voi olla myönteinen vaikutus kasvuun tiettyjä kasveja. -Kanta P. vulgaris maaperästä on teetä istutus tuottaa sideroforien , joka parantaa biologista hyötyosuutta rautaionien varten teepensaan ( Camellia sinensis ). Myös tämän kannan tuottamat sienilääkkeet patogeenistä Fusarium moniliformae -sientä koskevassa testissä vaikuttavat ja siten tartunnan saaneiden palkokasvien kasvu edistää. Maaperän ja vesien, jotka ovat saastuneet kanssa raskasmetallien , edustajat suvun (mukaan lukien P. mirabilis ja P. vulgaris ) voidaan havaita, että on vastustuskykyisiä ja kupari , kromi , koboltti , kadmium , sinkki ja elohopea . Joissakin tapauksissa voidaan jopa todistaa, että bakteerit voivat vähentää kromi (VI) -yhdisteiden määrää vedessä.

Proteus- suvun bakteerien ja niiden kolonisoimien eläinten ekologinen suhde on edelleen monissa tapauksissa epäselvä, mutta esimerkkejä opportunistisista infektioista, kommensalismi ja symbioosi löytyvät. P. mirabilis -kannat voivat aiheuttaa virtsatieinfektioita kotikissoilla, koirilla ja kotisiileillä. Proteus bakteerit ovat osa normaalifloora eläinten tämä koskee lukuisia lintuja, myös siipikarja kuten kotieläimet , esimerkiksi varpuset , mustarastaat , korpit ja varikset ( Corvus spp.), Kattohaikara ( Ciconia ciconia ) ja kotimaan hanhet . Bakteerit löytyvät kloakasta , ulosteista ja joskus nokasta .

Putressiini tuotetaan dekarboksyloimalla ornitiinin aminohappo

Putrescine

L- ornitiini

Lukuisia edustajat kärpäset (mukaan lukien housefly Musca domestica , yhteinen pureva lentää Stomoxys calcitrans ja eri lihakärpäsiin Lucilia spp.) Nämä bakteerit ovat tärkein osa microbiome ruoansulatuskanavan sekä kehon pinnan. Kärpäset toimivat vektorina , jonka kautta bakteerit siirtyvät muihin eläviin olentoihin. Yksi hypoteesi koskee sanansaattajia , The " valtakunnan -übergreifend" toimia (engl. Inter-valtakunnan signalointi ) - suhteen Eliöryhmien eläinten ja bakteerit - ja se perustuu ekologiseen suhteesta P. mirabilis ja kulta lentää Lucilia sericata kuin isäntä . Signaaliaineet ovat haihtuvia yhdisteitä, kuten putressiini , joita P. mirabilis tuottaa, kun typpeä sisältävä kuollut biomassa hajoaa. Putrescine vaikuttaa mädäntymisen hajuun ja houkuttelee kultakärpän ruhoon . Samanaikaisesti putrescine on solunulkoinen välittäjäaine, joka on välttämätön bakteerisolujen parveilemiselle.

Kantoja P. mirabilis ja P. vulgaris kuuluvat symbioottinen suolistofloorassa Intian jättiläinen lepakko ( Pteropus giganteus ) ja yhdessä muiden enterobakteerit, on tärkeä rooli sen ruoansulatusta . Mikro-organismit tuottavat entsyymejä ( sellulaaseja ja ksylanaaseja ), jotka hajottavat kasvisruokaan sisältyvän selluloosan tai ksylaanit , jolloin isäntäeläin voi käyttää metaboliitteja.

Lääketieteellinen merkitys

Proteus- bakteerit ovat osa ihmisen normaalia suolistoflooraa; joillakin edustajilla voi kuitenkin olla patogeeninen vaikutus jo heikentyneisiin ihmisiin, joten he kuuluvat opportunististen taudinaiheuttajien joukkoon. Voit täällä z. B. virtsateiden infektio , munuaisen lantion tulehdus , kystiitti ja eturauhastulehdus . Vatsatauti voi ilmetä, jos korkeasti saastuneita elintarvikkeita kulutetaan. Tartuntojen Proteus bakteerit esiintyy suhteellisen usein aikana sairaalassa ( sairaalainfektioiden ) ja voi sitten johtaa haavojen infektiot (esim. Siinä tapauksessa, palovammojen) tai sepsis . Virtsatietulehdukset usein esiintyä virtsateiden tukkeuma (obstruktiivinen uropathies), jälkeen kirurgiset toimenpiteet on tyhjennys virtsateiden tai pitkän aikavälin käyttö virtsan katetrit . Lajit P. mirabilis , P. vulgaris ja P. penneri eristetään yleisimmin ihmispotilaiden lääketieteellisistä näytteistä .

Virtsateiden infektioiden ongelma, erityisesti potilailla, joilla on katetreja, on biokalvon muodostuminen nopean kasvun takia. Jotta asiat pahempaa, biofilmien hallitsee mukaan Proteus , kiteitä muodostuu kautta Biomineralization on ureaa , joka johtaa kuoren muodostumista ja lopulta tukkeutumista katetrin.

ECDC: n ( Euroopan tautien ehkäisy- ja valvontakeskus ) vuonna 2016 julkaisemassa raportissa tehohoitoyksiköissä hankituista virtsatieinfektioista ( Proteus- suku) bakteerit aiheuttavat 5,4% tapauksista. Ainoastaan ​​Saksan osalta korko on korkeampi, 7,9%.

Antibioottiresistenssi ja tehokkaat antibiootit

Proteus lajeja P. mirabilis , P. penneri ja P. vulgaris ovat luonnostaan vastustuskykyisiä , että antibioottien tetrasykliinit , Tigesykliinin , kolistiini ja nitrofurantoiini . P. mirabilis -kannat ovat yleensä herkempiä antibiooteille kuin P. vulgaris , P. penneri ja P. hauseri -kannat . Siten P. mirabilis on periaatteessa herkkä ampisilliinille ja kefalosporiineille kefatsoliinille ja kefuroksiimille (1. ja 2. sukupolven kefalosporiinien lyijyyhdisteet ), kun taas P. pennerillä ja P. vulgarisilla on kuitenkin luonnollinen vastustuskyky. Ainakin P. vulgaris muodostumista β-laktamaasien pidetään syynä. Bakteerikantojen resistenssi voi kuitenkin vaihdella ajan ja alueen mukaan. Näin ollen, ainakin siinä tapauksessa, vakavia infektioita tai hoidon epäonnistuminen, on suositeltavaa tarkistaa resistenssi tiettyjen antibioottien, eli suorittaa antibiogram , jotta voidaan tunnistaa tehokas antibiootti terapiaan.

P. mirabilis on pohjimmiltaan herkkä aminopenisilliinille (ampisilliini ja amoksisilliini ) ja ureidopenisilliinille ( piperasilliini ), kefalosporiineille , esimerkiksi kefatsoliinille, kefoksitiinille (1. sukupolvi); Kefuroksiimi (2. sukupolvi); Kefotaksiimi , keftatsidiimi , keftitsoksiimi , keftriaksoni (kolmannen sukupolven) ja kefepiimiä (4. sukupolvi), aminoglykosidiantibiootit ( amikasiini , gentamisiini ja tobramysiini ), imipeneemi ryhmästä karbapeneemien , siprofloksasiinin ryhmästä fluorokinolonien ja sulfatrimetopriimin . Siprofloksasiiniresistenssiä on havaittu sairaalahoidon aikana esiintyneissä P. mirabilis -infektioissa (sairaalahoito) . Jo vuonna 1979 raportoitiin muun muassa yksittäisten P. mirabilis -kantojen resistenssejä . antibiootit ampisilliini, kefalotiini , kloramfenikoli , karbenisilliini , kolistiini , kotrimoksatsoli ja lukuisat aminoglykosidiantibiootit (mukaan lukien streptomysiini ja gentamysiini).

P. penneri ja P. vulgaris ovat yleensä herkkiä kefoksitiinille ja laajakirjoisille kefalosporiineille (kefotaksiimi, keftatsidiimi, keftizoksiimi, keftriaksoni, kefepiimi), aztreonaamille , aminoglykosidiantibiooteille, siprofloksasiinille ja imipeneemille. Lisäksi voidaan käyttää P-laktamaasin estäjiä , kuten tatsobaktaamia . Mahdolliset resistenssit koskevat kefalosporiineja kefatsoliinia, kefprotsiilia, kefuroksiimia, kefamandolia , kefdiniriä , kefoperatsonia , lorakarbefia ja penisilliinien ureidopenisilliinejä ja ampisilliineja.

Useimmat Proteus- lajit ovat herkkiä kinoloniantibiooteille ja laajakirjoisille toisen ja kolmannen sukupolven kefalosporiineille. Komplisoimattoman virtsatieinfektion hoidossa Proteus TYPES -tabletteja suositellaan toisinaan kotrimoksatsolille .

turvota

kirjallisuus

• Caroline Mohr O'Hara, Frances W.Brenner, J.Michael Miller: Proteuksen, Providencian ja Morganellan luokittelu, tunnistaminen ja kliininen merkitys . Julkaisussa: Clinical Microbiology Reviews . nauha 13 , ei. 4 . American Society for Microbiology, Washington, lokakuu 2000, s. 534-546 , doi : 10.1128 / cmr.13.4.534-546.2000 , PMID 11023955 , PMC 88947 (vapaa kokoteksti). 
• Dominika Drzewiecka: Proteus spp : n merkitys ja roolit Bakteerit luonnossa . Julkaisussa: Microbial Ecology . nauha 72 , ei. 4. tammikuuta 2016, s. 741-758 , doi : 10.1007 / s00248-015-0720-6 , PMID 26748500 , PMC 5080321 (vapaa kokoteksti). 

Yksittäiset todisteet

1. B ^{a b c d e f g h i j k l m} C.M.O'Hara, FW Brenner, JM Miller: Proteuksen, Providencian ja Morganellan luokittelu, tunnistaminen ja kliininen merkitys . Julkaisussa: Clinical Microbiology Reviews . nauha 13 , ei. 4 , lokakuu 2000, s. 534-546 , doi : 10.1128 / cmr.13.4.534-546.2000 , PMID 11023955 , PMC 88947 (vapaa kokoteksti). 
2. ↑ ^{a b c d e f g} Antoni Różalski, Agnieszka Torzewska, Magdalena Moryl, Iwona Kwil, Agnieszka Maszewska, Kinga Ostrowska, Dominika Drzewiecka, Agnieszka Zabłotni, Agata Palusiak, Małgorzata Siwińska sp. - opportunistinen bakteeripatogeeni - luokittelu, kasvava parvi, kliininen merkitys ja virulenssitekijät . Julkaisussa: Folia Biologica et Oecologica . nauha 8 , ei. 1. joulukuuta 2012, s. 1-17 ( sciendo.com ). 
3. ↑ George M.Garrity: Bergeyn käsikirja systemaattisesta bakteriologiasta. 2. painos. Springer, New York, 2005, osa 2: proteobakteerien , Osa B: gammaproteobacteria ISBN 0-387-24144-2
4. B ^{a b} JN Schaffer, MM Pearson MM.: Proteus mirabilis ja virtsatieinfektiot. Julkaisussa: Microbiol Spectrum . nauha 3 , ei. 5 , 2015, s. UTI-0017-2013 , doi : 10.1128 / microbiolspec . UTI -0017-2013 . 
5. Man ^{a b c} J.Manos, R.Belas: Genera Proteus, Providencia ja Morganella . Julkaisussa: Prokaryootit . nauha 6 , 2006, s. 245-269 , doi : 10.1007 / 0-387-30746-x_12 . 
6. ↑ Randy M. Morgenstein, Bree Szostek & Philip N. pikemminkin: geeniekspression säätely parvesolujen erilaistumisen aikana Proteus mirabilisissa . Julkaisussa: FEMS Microbiol Rev. Volume 34 , 2010, s. 753-763 , doi : 10.1111 / j.1574-6976.2010.00229.x . 
7. ↑ Chelsie E. Armbruster ja Harry LT Mobley: Yhdistyvä mytologia ja morfologia: Proteus mirabilisin monipuolinen elämäntapa . Julkaisussa: Nat. Ilm. Mikrobiol. nauha 10 , ei. 11 , 2012, s. 743-754 , doi : 10.1038 / nrmicro2890 . 
8. ↑ ^{a b c d e f g h} Dong-Wook Hyun, Mi-Ja Jung, Min-Soo Kim, Na-Ri Shin, Pil Soo Kim, Tae Woong Whon, Jin-Woo Bae: Proteus cibarius sp. marraskuu, parveileva bakteeri Jeotgalista, perinteisestä korealaisesta fermentoidusta äyriäisestä, ja antoi kuvauksen suvusta Proteus . Julkaisussa: International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology . nauha 66 , ei. 6. kesäkuuta 2016, s. 2158-2164 , doi : 10,1099 / ijsem.0.001002 . 
9. B ^{a b c d e f g h i j} Dominika Drzewiecka: Proteus spp : n merkitys ja roolit. Bakteerit luonnossa . Julkaisussa: Microbial Ecology . nauha 72 , ei. 4. tammikuuta 2016, s. 741-758 , doi : 10.1007 / s00248-015-0720-6 , PMID 26748500 , PMC 5080321 (vapaa kokoteksti). 
10. Ote Proteus. Julkaisussa: National Center for Biotechnology Information (NCBI) Genome website . Haettu 8. helmikuuta 2021 . 
11. ↑ ^{a b} Enterobakteerit, Proteus . Julkaisussa: Helmut Hahn, Stefan HE Kaufmann, Thomas F.Schulz, Sebastian Suerbaum (toim.): Lääketieteellinen mikrobiologia ja tartuntataudit . 6. painos. Springer Verlag, Heidelberg 2009, ISBN 978-3-540-46359-7 , s. 237, 250 . 
12. ↑ TRBA (tekniset säännöt biologisille aineille) 466: Prokaryoottien (bakteerien ja arkkien) luokittelu riskiryhmiin. Julkaisussa: Liittovaltion työturvallisuus- ja työterveyslaitoksen (BAuA) verkkosivusto . 25. elokuuta 2015, s.346 , käytetty 27. joulukuuta 2019 (viimeisin muutos 14. elokuuta 2019). 
13. ↑ EMB-agar. Julkaisussa: Merck Millipore -sivusto . Haettu 26. joulukuuta 2019 . 
14. ↑ ^{a b c d e} C. M. O'Hara, FW Brenner, JM Miller, B. Holmes, PA Grimont, JL Penner, AG Steigerwalt, DJ Brenner, BC Hill, PM Hawkey: Proteus vulgaris bioryhmän 3 luokitus Proteus hauserin tunnustuksella sp. marraskuu, nim. rev. ja nimettömät Proteus genomospecies 4, 5 ja 6. julkaisussa: International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology . nauha 50 , ei. 5. syyskuuta 2000, s. 1869-1875 , doi : 10.1099 / 00207713-50-5-1869 . 
15. ↑ ^{a b c d} Hang Dai, Yonglu Wang, Yujie Fang, Zhenzhou Huang, Biao Kan, Duochun Wang: Proteus alimentorum sp. marraskuu, eristetty sianlihasta ja hummerista Ma'anshanin kaupungissa Kiinassa . Julkaisussa: International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology . nauha 68 , ei. 4. huhtikuuta 2018, s. 1390-1395 , doi : 10.1099 / ijsem.0.002689 . 
16. ↑ ^{a b c d} Hang Dai, Yonglu Wang, Yujie Fang, Tao Xiao, Zhenzhou Huang, Biao Kan, Duochun Wang: Proteus columbae sp. marraskuu, eristetty kyyhkysestä Ma'anshanissa Kiinassa . Julkaisussa: International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology . nauha 68 , ei. 2. helmikuuta 2018, s. 552-557 , doi : 10.1099 / ijsem.0.002541 . 
17. ↑ Saksalainen mikro-organismien ja soluviljelmien kokoelma (DSMZ): Proteus vulgaris, tyypin kanta. Julkaisussa: Website BacDive . Haettu 23. joulukuuta 2019 . 
18. B ^{a b} Ali Kassim, Valentin Pflüger, Zul Premji, Claudia Daubenberger, Gunturu Revathi: Biomarkkeripohjaisen matriisiavusteisen lasersorptioionisaation ja lentomassaspektrometrian (MALDI-TOF MS) ja tavanomaisten menetelmien vertailu kliinisesti merkityksellisten bakteerien ja hiiva . Julkaisussa: BMC Microbiology . nauha 17. toukokuuta 2017, s. 128 (online) , doi : 10.1186 / s12866-017-1037-z , PMID 28545528 , PMC 5445374 (ilmainen kokoteksti). 
19. ↑ Wei Li, Enhua Sun, Ying Wang, Hongwei Pan, Y. i. Zhang, Yong Li, Xin Zhang, Chen Li, Lutao Du, Chuanxin Wang: Virtsateiden patogeenien nopea tunnistaminen ja mikrobilääkeherkkyyden testaus virtsanäytteiden suoralla analyysillä käyttäen MALDI-TOF MS-pohjaista yhdistettyä protokollaa . Julkaisussa: Frontiers in Microbiology . nauha 10. kesäkuuta 2019, s. 1182 (online) , doi : 10.3389 / fmicb.2019.01182 , PMID 31231323 , PMC 6560049 (ilmainen kokoteksti). 
20. B ^{a b c d} Jean Euzéby, Aidan C.Parte: Genus Proteus. Julkaisussa: Luettelo prokaryoottinimistä, joilla on pysyvä nimikkeistö, bakteerien järjestelmällisyys (LPSN) . Haettu 17. syyskuuta 2020 . 
21. B ^{a b} Taksonomian selainproteesit. Julkaisussa: National Center for Biotechnology Information (NCBI) -sivusto . Haettu 27. joulukuuta 2019 . 
22. ↑ ^{a b} U. Behrendt, J. Augustin, C. Spröer, J. Gelbrecht, P. Schumann, A. Ulrich: Proteus terrae sp. : nov., N ₂ O-tuottamiseksi, nitraatti-ammonifying maabakteeri . Julkaisussa: Antonie van Leeuwenhoek . nauha 108 , ei. 6. joulukuuta 2015, s. 1457-1468 , doi : 10.1007 / s10482-015-0601-5 . 
23. ↑ Giovanni M.Giammanco, Patrick AD Grimont, Francine Grimont, Martine Lefevre, Giuseppe Giammanco, Sarina Pignato: Proteus- , Morganella- ja Providencia-sukujen filogeneettinen analyysi vertaamalla tyypin ja kliinisten kantojen rpoB-geenisekvenssejä ehdottaa Proteus myxofaciensin luokittelua uudelleen uusi suku, Cosenzaea gen. nov., kun Cosenzaea myxofaciens kampa. marraskuu. julkaisussa: International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology . Osa 61, heinäkuu 2011, s.1638-1644. doi : 10.1099 / ijs.0.021964-0 .
24. ^ ^{A b c} Herbert Hof, Rüdiger Dörries: Kaksoissarja: Lääketieteellinen mikrobiologia . 3. painos. Thieme Verlag, Stuttgart 2005, ISBN 978-3-13-125313-2 , s. 11-12, 289-296, 399-400 . 
25. ^ Reham Wasfi, Samira M.Hamed, Mai A.Amer & Lamiaa Ismail Fahmy: Proteus mirabilis Biofilm: Kehitys- ja terapeuttiset strategiat. Julkaisussa: Front. Solu. Tartuttaa. Mikrobioli. nauha 10 , 2020, s. 414 , doi : 10.3389 / fcimb.2020.00414 . 
26. ↑ Tehohoitoyksiköissä hankitut terveydenhoitoon liittyvät infektiot - vuotuinen epidemiologinen raportti vuodelta 2016. (PDF; 962 kt) ECDC: n seurantaraportti. Euroopan tautien ehkäisy- ja valvontakeskus (ECDC), toukokuu 2018, s. 1–11 , käyty 24. toukokuuta 2018 . 
27. B ^{a b c} R.Leclercq ym.: EUCASTin asiantuntijasäännöt mikrobilääkeherkkyystesteissä . Julkaisussa: Kliininen mikrobiologia ja infektiot . nauha 19 , ei. 2 . Wiley-Blackwell, helmikuu 2013, ISSN  1469-0691 , s. 141-160 , doi : 10.1111 / j.1469-0691.2011.03703.x , PMID 22117544 ( wiley.com ). 
28. ↑ Kemoterapialehti 4-2006 ( Memento , 12. maaliskuuta 2014 Internet-arkisto )
29. ↑ "Aktiivisten ainesosien päivitykset", numero 2/2012 ( Memento 7. marraskuuta 2014 Internet-arkistossa )

nettilinkit

Tämä artikkeli on lisätty luetteloon erinomaisia artikkeleita on tässä versiossa 21. helmikuuta 2021 .